ВЛИЯНИЕ ЭКЗОГЕННОГО ГЛЮКОЗАМИНА ГИДРОХЛОРИДА И ХОНДРОИТИНА СУЛЬФАТА НА БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ СЫВОРОТКИ КРОВИ И ТКАНИ ПАРОДОНТА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ВОСПАЛЕНИИ

Полный текст

Несмотря на высокие достижения современной медицины, воспалительно-дистрофические поражения тканей пародонта занимают лидирующее место среди стоматологических заболеваний и представляют собой серьезную медико-социальную проблему [4, 6]. Как известно, строма пародонтального комплекса представлена различными видами соединительной ткани, которые в условиях воспалительного процесса неуклонно подвергаются разрушению, приводя к потере зубодесневого и зубоальвеолярного прикрепления, потере костной ткани, и, как следствие, к потере зубов [16, 17]. Медикаментозное лечение как часть комплексной терапии воспалительно-дистрофических заболеваний пародонта должно быть направлено на различные звенья патологического процесса [3, 11, 13]. Наиболее значимо и актуально при лечении данной патологии - назначение препаратов, которые, помимо выраженного противовоспалительного действия, еще и усиливали бы процессы регенерации в связочном аппарате зубного ряда [10, 14, 15]. Глюкозамин, будучи природным структурным компонентом биомембран, определяет важную роль в защитной функции эпителия десны, осуществляющуюся глюкозаминогликанами, входящими в состав склеивающего вещества между клетками многослойного плоского эпителия, которые поддерживают механическую прочность клеточной стенки и препятствуют проникновению микроорганизмов и их токсинов в подлежащую ткань [2, 5]. Использование глюкозамина способствует уменьшению механической деформации тканей, оптимизации их взаимного расположения и кровоснабжения [7, 8]. Второе направление - стимуляция анаболических и регенераторных процессов в соединительной и других видах тканей [1, 11]. Как известно, прием глюкозамина стимулирует биосинтетические процессы в соединительной ткани, что ведет к сокращению сроков ее восстановления после поражения физическими и химическими факторами [12, 18]. Третье направление протекторного действия глюкозамина - это ингибирование активности лизосомальных ферментов, разрушающих соединительную ткань, а также другие виды тканей организма [11]. Особенно отчетливо оно проявляется при наличии воспалительных и дистрофических процессов в соединительной ткани. Есть данные, свидетельствующие о значительной роли гиалуроновой кислоты в регуляции капиллярно-соединительных структур, а также о том, что глюкозаминогликаны обеспечивают защиту тканей пародонта от бактериальных и токсических агентов [9, 14]. Цель исследования - оценка влияния экзогенного глюкозамина гидрохлорида и хондроитина сульфата на биохимические показатели сыворотки крови и ткани пародонта при экспериментальном воспалении. Материал и методы Экспериментальные исследования выполнены на 60 белых крысах линии Вистар массой 220-250 г, которые находились на стандартном пищевом и водном рационе в соответствии с санитарно-гигиеническими нормами. Опыты проводили с соблюдением Международных принципов Европейской конвенции о "Защите позвоночных животных, используемых для экспериментов и других научных целей" (Страсбург, 1986), "Общими этическими принципами экспериментов на животных" (Россия, 2011), в соответствии с принципами надлежащей лабораторной практики (Национальный стандарт "Принципы надлежащей лабораторной практики" ГОСТ Р 53434-2009) и положительным заключением этического комитета СтГМУ № 32 от 12.02.2014. Исследование осуществлено в рамках Государственного задания Министерства здравоохранения Российской Федерации для ГБОУ ВПО "Ставропольский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации по осуществлению научных исследований и разработок по теме: "Ткани пародонта в регенерации и иммуномодуляции" от 14.01.2014 г. № 302/09 совместно с Всероссийским НИИ овцеводства и козоводства и Ставропольским государственным аграрным университетом (Ставрополь). Животных разделили на 3 группы: 1-я группа - интактные (n = 20 животных); 2-я группа - крысы с экспериментальным гингивитом (n = 20); 3-я - крысы с экспериментальным гингивитом, которым перорально вводили водный раствор глюкозамина гидрохлорида и хондроитина сульфата натрия (Theraflex, Sagmel, Inc., США) в дозе 30 мг/кг 3 раза в сутки (n = 20); (продолжительность эксперимента составляла 90 сут: 60 сут - моделирование гингивита; 30 сут - лечение). Модель экспериментального гингивита формировали в два этапа: на 1-м этапе - путем создания дисбактериоза ротовой полости (внутримышечное введение линкомицина гидрохлорида дозой 30 мг/кг 2 раза в день в течение 5 дней) и последующим локальным поражением десен и тканей преддверия рта аппликациями суспензии пчелиного яда (в дозе 1 мг/кг 2 раза в день в течение 5 дней). Аппликации проводили в двух участках преддверия рта между нижней губой и резцами нижней челюсти и между молярами верхней и нижней челюстей и щекой справа. Лечение начинали со следующего дня после окончания воспроизведения патологии. Общую протеолитическую активность в сыворотке крови и гомогенатах тканей пародонта определяли по методу B.F. Erlanger (по расщеплению N-a-бензоил-D,L-аргинина паранитроанилида). Определение активности щелочной и кислой фосфатаз в сыворотке крови проводили по методу Боданского (1992), который основан на способности ферментов отщеплять неорганический фосфат от b-глицерофосфата. Для определения активности щелочной фосфатазы использовали щелочной раствор b-глицерофосфата, для кислой - кислый раствор b-глицерофосфата. Статистическую обработку полученных материалов исследований проводили с помощью однофакторного дисперсионного анализа и множественного сравнения Ньюмена в программе Primer of Biostatistics 4.03 для Windows. Достоверными считали различия при р < 0,05. Результаты Как показали результаты экспериментально-морфологического исследования, развитие клинической картины гингивита сопровождалось изменениями биохимических показателей в сыворотке крови и тканях десны крыс. Исследование общей протеолитической активности (ОПА) в сыворотке крови крыс с экспериментальным воспалением пародонта свидетельствовало о повышении ее показателей в течение всего эксперимента по сравнению с данными, полученными у интактных животных. Поскольку повышение уровня общей протеолитической активности в сыворотке крови косвенно свидетельствует о наличии воспалительного процесса в организме, самые высокие показатели зарегистрированы на 5-10-е сутки эксперимента. Под влиянием экзогенного глюкозамина гидрохлорида и хондроитина сульфата в основной группе наблюдали снижение ОПА до показателей интактных крыс на 20-е сутки эксперимента. Начиная с 10-х суток наблюдений, уровень суммарной активности в основной группе животных был достоверно ниже аналогичного показателя у крыс контрольной группы (табл. 1). Следовательно, применение экзогенного глюкозамина гидрохлорида и хондроитина сульфата способствовало снижению уровня универсального показателя воспаления - общей протеолитической активности, что свидетельствует об определенном положительном влиянии экзогенного глюкозамина гидрохлорида и хондроитина сульфата на системный гомеостаз. Исследование общей протеолитической активности гомогенатов тканей пародонта также позволило установить изменения, аналогичные тем, что наблюдались в сыворотке крови (табл. 2). В группе животных с экспериментальным гингивитом без лечения отмечена повышенная общая протеолитическая активность в течение всего периода эксперимента, но максимальное ее увеличение наблюдалось на 5-10-е сутки. Под влиянием экзогенного глюкозамина гидрохлорида и хондроитина сульфата общая протеолитическая активность в гомогенатах тканей пародонта снизилась до нормы уже на 20-е сутки эксперимента. Начиная с 15-х суток и до окончания эксперимента, показатели ОПА имели более низкие значения по сравнению с группой животных контрольной группы. Таким образом, применение экзогенного глюкозамина гидрохлорида и хондроитина сульфата при экспериментальном воспалении тканей пародонта оказывает противовоспалительный и пародонтопротекторный эффекты, нормализуя процесс протеолиза. При экспериментальном гингивите вместе с интенсификацией процессов протеолиза отмечена активация лизосомального фермента кислой фосфатазы как в сыворотке крови, так и в гомогенатах тканей пародонта (табл. 3), что свидетельствует о повреждении и разрушении мембран клеток пародонта. Нормализация активности кислой фосфатазы в сыворотке крови и гомогенатах тканей пародонта у животных контрольной группы происходила лишь на 20-е сутки эксперимента. В основной группе животных нормализация этого показателя в сыворотке крови наблюдалась на 10-е сутки, а в гомогенатах тканей пародонта - на 15-е сутки. Поскольку кислая фосфатаза служит одним из маркеров воспаления, уменьшение ее активности под влиянием экзогенного глюкозамина гидрохлорида и хондроитина сульфата свидетельствовало о положительном влиянии данных веществ на воспалительный процесс в пародонте и сокращение сроков выздоровления крыс с экспериментальным гингивитом. Заключение Таким образом, применение экзогенного глюкозамина гидрохлорида и хондроитина сульфата при экспериментальном воспалении тканей пародонта положительно влияет на биохимические показатели в сыворотке крови и ткани пародонта: приводит к нормализации таких маркеров воспаления, как общая протеолитическая активность и активность кислой фосфатазы, что свидетельствует о противовоспалительном и пародонтопротекторном эффекте используемого лечебного средства.

Об авторах

Наталья Ильинична Быкова

ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России

Email: bykovan@rambler.ru
канд. мед. наук, доцент каф. детской стоматологии, ортодонтии и челюстно-лицевой хирургии Кубанского государственного медицинского университета, Россия, 355063, г. Краснодар, Россия

А. В Одольский

ФГБОУ ВО СтГМУ Минздрава России

Россия, 355017, г. Ставрополь, Россия

И. М Быков

ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России

Россия, 355063, г. Краснодар, Россия

В. А Григорян

ФГБОУ ВО СтГМУ Минздрава России

Россия, 355017, г. Ставрополь, Россия

Список литературы

Дополнительные файлы