A COMPARATIVE STUDY OF THE CYTOTOXICITY MILLED AND MOULDED DENTAL ALLOYS IN THE CULTURE OF MESENCHYMAL STEM CELLS

Full Text

Технологии CAD/CAM завоевывают передовые позиции в зубопротезной практике [1-7]. Компьютерное планирование параметров несъемного протезирования в соответствии с индивидуальными условиями протезного поля, фрезерование протеза или каркаса из цельного блока конструкционного материала вносят радикальные изменения в технологию изготовления искусственных коронок и мостовидных протезов. Компьютеризированное фрезерование протезов направлено на повышение качества ортопедического лечения за счет устранения этапа воскового моделирования и литья, прецизионности краевого прилегания коронок к опорным зубам или абатментам имплантатов. При этом сохраняются высокие требования к биологической совместимости конструкционных материалов. В России актуально применение фрезерных технологий при изготовлении металлокерамических протезов с каркасами из неблагородных сплавов, а также из титана (в связи с широким применением титановых имплантатов). 12 экспериментально-теоретические исследования а Ли т. ті б Лит. Ті Эффективность пролиферации МСК на образцах стоматологических сплавов. а - оптическая плотность, %; б - количество клеток, тыс. Цель исследования - в культуре мезенхимальных стволовых клеток (МСК) из костной ткани человека изучить цитотоксичность фрезерованных и литых стоматологических сплавов - хромкобальтовых и титановых. Материал и методы Для изучения степени биосовместимости фрезерованного и литого хромкобальта и титана использовали культуру МСК человека. С помощью МТТ-теста оценивали влияние разной обработки сплавов на жизнеспособность и пролиферацию клеток, а также на метаболические процессы. Для визуализации жизнеспособных и погибших клеток использовали метод прижизненной окраски клеток флюорес-цеина диацетатом (FDA) и бромистым этидием (EtBr); для визуальной оценки морфологии клеток применяли окрашивание фиксированных клеток акридиновым оранжевым. Оптическую плотность элюата формазана клеток измеряли на фотометре «ЭФОС 9305» при длине волны 570 нм. После окрашивания клеток препараты просматривали при помощи флюоресцентного микроскопа Jenalumar при длине волны возбуждения флюоресценции 450 нм и с фильтром G 247. Длительность инкубации клеток с образцами сплавов составляла 3-7 сут. Исследовали стоматологические сплавы для металлокерамики: хромкобальтовые сплавы Starbond, Германия (для литья) и Gialloy, Германия (для фрезерования); титановые сплавы Rematitan, Германия (для литья) и Grade 5, США (для фрезерования). Результаты и обсуждение При оценке цитотоксичности литых и фрезерованных титановых и хромкобальтовых сплавов с помощью МТТ-теста не отмечено достоверной разницы относительной оптической плотности элюатов культуры МСК из костной ткани человека в присутствии изучаемых стоматологических сплавов в течение 3 сут. При нормативной относительной плотности в контроле 0,500±0,0110 ед. значения для хромкобальтовых литых, хромкобальтовых фрезерованных, титановых литых, титановых фрезерованных сплавов составляли 0,473±0,218; 0,482±0,0415; 0,486±0,0068 и 0,492±0,034 ед., что соответствовало относительной оптической плотности исследуемых элюатов, равной 94,6, 96,4, 97,2 и 98,4% (см. рисунок). Показатели МТТ-теста подтверждаются анализом пролиферации МСК на фрезерованных и литых хромкобальтовых и титановых сплавах в течение 7 сут. В среднем за этот период количество МСК утраивалось. При нормативном количестве клеток в контроле, равном 69,8 тыс., соответствующие значения для хромкобальтово-го литого, хромкобальтового фрезерованного, титанового литого, титанового фрезерованного сплавов достоверно от него не отличались и составляли 66,9±2,72, 67±3,12, 68,5±2,4 и 71,1±2,96. Выявлено, однако, статистически значимое преимущество фрезерованного титанового сплава в сравнении с литым и фрезерованным хромкобальтовыми сплавами по эффективности пролиферации МСК. Окрашивание культуры МСК на сплавах акридиновым оранжевым и FDA-EtBr выявило в плотном слое жизнеспособных клеток находящиеся в митозе при изучении образцов титанового сплава (фрезерованного и литого; см. рисунок). Таким образом, проведенное исследование позволяет сделать следующие выводы: • фрезерование хромкобальтового сплава в сравнении с технологией литья нє влияет на его биосовместимость в культуре МСК; • различия показателей пролиферации МСК при изучении фрезерованных и литых хромкобальтовых и титановых сплавов по сравнению с контролем статистически незначимы; • фрезерованный титановый сплав имеет преимущества по степени жизнеспособности МСК в клеточной культуре.

About the authors

V. A Rudakov

E. V Kiszko

M. D Zuev

M. A Amirkhanian

A. A Sobolev

S. P Yarilkina

A. Ya Lerner

References

Supplementary files