Periodontology status and features local cytokine immunity in pregnant women with chronic generalized parodontitis in dynamics of gestational period

Full Text

Высокая распространенность и рост интенсивности основных стоматологических заболеваний у женщин во время беременности представляют значимую социальную проблему [1]. Инфекционные процессы в полости рта, особенно хронический пародонтит тяжелой степени, могут быть причиной общей воспалительной реакции организма. Это бывает обусловлено тем, что из пародонтальных карманов выделяется в основном анаэробная микрофлора, которая способна вызвать бактериемию [2]. При беременности вследствие колебания уровней половых гормонов изменяется иммунный статус организма, что делает его более восприимчивым при инфицировании и способствует быстрому распространению инфекции [3]. Во время беременности повышается патогенность флоры полости рта, которая имеет тенденцию изменяться под неблагоприятным воздействием общих и местных факторов, в связи с чем увеличивается интенсивность стоматологических заболеваний [4]. Воспалительные медиаторы становятся ведущим патогенетическим звеном в развитии и течении заболеваний пародонта. Цитокины, продуцирующиеся специфическими и неспецифическими иммунокомпетентными клетками, регулируют процессы воспаления, тканевой репарации, остеорезорбции и остеосинтеза в тканях пародонта [5]. В связи с этим целью работы явилась оценка состояния тканей пародонта и гигиены полости рта, а также местного цитокинового профиля у женщин с хроническим генерализованным пародонтитом легкой и средней степени тяжести в динамике беременности. Материал и методы В клинической группе у 31 беременной женщины в возрасте 18-35 лет с хроническим генерализованным пародонтитом (ХГП) последовательно на протяжении всех трех триместров беременности (первый триместр - 8-12 нед, второй - 13-27 нед, третий - 28-40 нед) оценивали цитокиновый статус ротовой жидкости путем определения уровня интерлейкинов ИЛ-1Р, ИЛ-4, ИЛ-6 и фактора некроза опухоли ФНОа. В контрольную группу включили 31 беременную женщину с физиологическим протеканием беременности и отсутствием стоматологической патологии. Кроме того, в работе учитывали результаты лабораторного исследования ротовой жидкости у 32 здоровых доноров женского пола без беременности в возрасте 18-30 лет. Средний возраст беременных женщин в клинической группе составил 26,9±1,9 года, а в контрольной группе - 29,1±1,9 года. Достоверных различий по возрасту между группами не выявлено. Для характеристики состояния тканей пародонта использовали следующие индексы: индекс эффективности гигиены полости рта PHP, индекс гигиены апроксимальных поверхностей API, индекс гингивита GI (Loe H., Silness J.), папиллярно-маргинально-альвеолярный индекс РМА, индекс CPITN, индекс КПУ - сумма кариозных, пломбированных и удаленных зубов у одного индивидуума. Для исследований содержания цитокинов использовали ротовую жидкость, собранную натощак, утром, без стимуляции, а также венозную кровь пациенток, взятую с 8 до 10 ч утра в пластиковые пробирки BD Vacutainer (BD Bioscience). В ротовой жидкости методом иммуноферментного анализа (ИФА) при помощи соответствующих тест-систем («Вектор- Бест», Россия) определяли содержание про- и противовоспалительных цитокинов: интерлейкинов ИЛ-ф, ИЛ-4 и ИЛ-6, фактора некроза опухоли ФНОа. Таблица 1. Стоматологический статус пациенток клинической группы (n = 31) Значения показателей (M±m) Показатель I триместр (8-12 нед) II триместр (13-27 нед) III триместр (28-40 нед) Индекс эффективности гигиены PHP 1,85±0,15 1,46±0,11* 1,95±0,13*° Индекс гигиены апрок- симальных поверхностей API, % 52,4±1,28 37,5±1,43* 46,8±1,35*° Индекс гингивита 1,85±0,19 2,07±0,13 2,34±0,15* Папиллярно-маргинальноальвеолярный индекс РМА 35,40±2,56 44,20±1,74* 58,70±1,65*° Индекс CPITN 3,01±0,21 3,89±0,24* 3,92±0,36* Индекс КПУ: 1,44±0,12 1,58±0,13 1,71±0,16 кариозные - - 0,10±0,001 пломбированные 0,35±0,06 0,35±0,06 0,41±0,07 удаленные 1,11±0,18 1,24±0,17 1,24±0,17 Примечание. * - достоверные отличия по сравнению с показателями в I триместре; ° - достоверные отличия по сравнению с показателями во II триместре (p < 0,05). Original article В ходе ИФА использовались термошейкер ST-3 (Латвия) и аппарат для промывания планшетов Elisa Washer Human (США), оценку полученных результатов проводили на фотометре Multilabel Counter 1420 Victor (Финляндия). Количественное определение ФНОа проводилось с применением набора реактивов «а-ФНО-ИФА-БЕСТ» (ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск). Количественное определение ИЛ-1Р проводилось с применением набора реактивов «ИЛ-1 бета-ИФА-Бест» (ЗАО «Вектор-Бест», г. Новосибирск). Количественное определение ИЛ-4 проводилось с применением набора реактивов «ИЛ-4-ИФА-Бест» (ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск). Количественное определение ИЛ-6 проводилось с применением набора реактивов «ИЛ-6-ИФА-Бест» (ЗАО «Вектор- Бест», Новосибирск). Статистическую обработку результатов исследования проводили с помощью программы Statistica 10 (StatSoft, США). Результаты Результаты оценки стоматологического статуса у пациенток клинической группы отражены в табл. 1. Срок гестации Возраст пациенток, годы 18-25 (п = 5) 26-28 (п = 7) 29-30 (п = 8) 31-35 (п = 11) р Таблица 2. Индекс CPITN (M±m) в зависимости от возраста и срока гестационного периода у пациенток в клинической группе (n = 31) I триместр (8-12 нед) 1,95±0,12 2,12±0,29 2,19±0,39 2,47±0,28 ^1-2, 1-3 > 0,05 p 1-4 < 0,05 2,21±0,19 3,19±0,31 3,12±0,47 3,71±0,49 Л-2,1-3, 1-4 < 0,05 2,42±0,24 3,67±0,37 3,96±0,48 4,02±0,51 Л-2, 1-3, 1-4, 2-4, 3-4 < 0,05 > 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 II триместр (13-27 нед) III триместр (28-40 нед) Гигиеническое состояние зубов у беременных женщин клинической группы в динамике беременности изменялось неравномерно: во втором триместре индекс эффективности гигиены PHP и индекс гигиены апроксимальных поверхностей API снижались, что являлось следствием проведения профессиональных гигиенических мероприятий в I триместре врачом-стоматологом и разъяснительной беседы о необходимости гигиены полости рта. Однако уже в III триместре изучаемые гигиенические индексы вновь повышались по отношению к таковым во II триместре, что указывало на низкий уровень гигиенического состояния полости рта. Динамика индекса гингивита, папиллярно- маргинально-альвеолярного индекса и индекса CPITN с повышением их значений к III триместру свидетельствовала о прогрессировании воспалительной патологии пародонта в течение беременности. p 2-3 В I, II и III триместрах беременности значения КПУ у пациенток клинической группы составили 1,44±0,12; 1,58±0,13 и 1,71±0,16 соответственно. Низкие значения индекса КПУ и его составляющих на протяжении всех трех триместров беременности свидетельствовали об отсутствии активного течения кариеса зубов. Величина индекса КПУ в основном обусловлена числом удаленных зубов. В первых двух триместрах непломбированные кариозные полости отсутствовали, а в III триместре их количество было крайне низким - 0,1±0,001. Изменялась и тяжесть ХГП в течение беременности. Легкая и средняя степень тяжести ХГП в I триместре встречались в 61,3 и 38,7% случаев, во II триместре - в 45,2 и 54,8%, а в III триместре - в 35,5 и 64,5%. В динамике гестационного периода число пациенток с легкой степенью тяжести ХГП снижалось за счет повышения числа больных со средней тяжестью. Далее было прослежено влияние возраста и срока беременности на интегративный пародонтологический индекс CPITN (табл. 2). Возраст и срок беременности являлись факторами, определяющими величину индекса CPITN: с увеличением возраста и срока беременности пародонтологический индекс повышался и имел наибольшую величину у женщин в возрасте 31-35 лет в III триместре (4,02±0,51). Таким образом, индексная оценка стоматологического статуса пациенток клинической группы свидетельствовала о прогрессировании ХГП в течение беременности с повышением степени тяжести заболевания, ухудшением гигиенического состояния полости рта, повышением индексов, отражающих состояние десен и твердых тканей пародонта. Содержание цитокинов в ротовой жидкости у пациенток с ХГП в динамике беременности отражено в табл. 3. У беременных женщин с физиологически протекающей беременностью по сравнению со здоровыми донорами без беременности содержание провоспалительных медиаторов ИЛ-1Р и ФНОа в ротовой жидкости не отличалось (p > 0,05) в течение всех трех триместров беременности. Вместе с тем при беременности имело место повышение концентрации в слюне провоспалительного медиатора ИЛ-6 в 3,4 раза (p < 0,05) и противовоспалительного цитокина ИЛ-4 на 74,3% (p < 0,05) только в III триместре беременности. Таблица 3. Содержание цитокинов в ротовой жидкости у пациенток с ХГП в динамике беременности, пг/мл (М±ш) Показа- Группа Триместр беременности тель I триместр (8-12 нед) II триместр (13-27 нед) III триместр (28-40 нед) р ИЛ-1Р Клиническая (п = 31) 43,80±3,28*° 102,50±3,89*° 186,40±3,8*° p 1-2, 1-3, 2-3 < 0,05 Контрольная (п = 31) 22,90±1,95 23,90±1,58 25,60±0,23 p 1-2, 1-3, 2-3 > 0,05 Доноры (п = 32) 23,2±2,74 ИЛ-4 Клиническая (п = 31) 17,40±1,28 29,50±1,15*° 42,80±1,30*° Л-2, 1-3, 2-3 < 0,05 Контрольная (п = 31) 16,40±0,97 17,10±0,96 26,50±1,70* p1-2 > 0,05 Л-3, 2-3 < 0,05 Доноры (п = 32) 15,20±1,50 ИЛ-6 Клиническая (п = 31) 6,70±0,70*° 11,40±0,90*° 18,70±1,40*° Л-2, 1-3, 2-3 < 0,05 Контрольная (п = 31) 1,20±0,30 1,40±0,40 3,05±0,08* p1-2 > 0,05 Л-3, 2-3 < 0,05 Доноры (п = 32) 0,89±0,06 ФНОа Клиническая (п = 31) 38,90±2,80 54,20±2,00*° 82,30±2,40*° Л-2, 1-3, 2-3 < 0,05 Контрольная (п = 31) 32,90±0,70 34,00±1,20 35,40±1,10 p 1-2, 1-3, 2-3 > 0,05 Доноры (п = 32) 33,40±1,60 Примечание. * - достоверные отличия по сравнению со здоровыми донорами (p < 0,05); ° - достоверные отличия по сравнению с контрольной группой. Оригинальная статья У беременных женщин с заболеваниями пародонта происходило резкое повышение содержания в слюне ИЛ-1Р начиная с I триместра гестационного периода, при этом к III триместру этот показатель увеличивался по сравнению со здоровыми донорами в 8,4 раза (p < 0,001), а по сравнению с беременными женщинами контрольной группы - в 7,3 раза (p < 0,001). Высокий уровень ИЛ-1Р в слюне у беременных женщин с заболеваниями пародонта свидетельствовал о генерализации воспалительно-деструктивных реакций в тканях пародонта. Этот провоспалительный медиатор после прикрепления к специфическим рецепторам на поверхности местных тканей способствует продукции эндотелиальными клетками адгезивных молекул, которые привлекают в регион воспаления полиморфноядерные гранулоциты и моноциты. При соединении с рецепторами, локализованными на фибро- бластах, ИЛ-ф вызывает индукцию синтеза коллагеназы, что задерживает образование коллагена и кости, угнетает остеосинтез [5]. Кроме того, ИЛ-ф стимулирует костную резорбцию. По сведениям Г. Барер и соавт. [6], при прогрессировании хронического генерализованного пародонтита уровень ИЛ-ф в слюне возрастает десятикратно. У беременных женщин с воспалительными заболеваниями пародонта по сравнению с контрольной группой концентрация ИЛ-6 в слюне была повышена в I триместре в 5,6 раза (p < 0,001), во II триместре - в 8,1 раза (p < 0,001) и в III триместре - в 6,2 раза (p < 0,001). ИЛ-6 отвечает за активацию дифференцировки B-лимфоцитов, их трансформацию в плазматические клетки с последующим синтезом иммуноглобулинов, фиксацией комплемента и секрецией хемотакси- ческих веществ [7]. Уровень ФНОа в слюне пациенток клинической группы по сравнению с контрольной группой во II триместре возрастал в 1,6 раза (p < 0,001), а в III триместре - в 2,3 раза (p < 0,001), что являлось неблагоприятным фактором, поскольку ФНОа активирует процессы остеорезорбции за счет стимуляции остеокластов. Длительное и выраженное повышение концентрации ФНОа вносит дисбаланс между остеообразующей функцией остеобластов и остеоразрушающей функцией остеокластов в сторону гиперактивации последних [8]. Итак, повышенное содержание провоспалительных медиаторов ИЛ-ф, ИЛ-6 и ФНОа в ротовой жидкости у беременных женщин с ХГП активирует разрушающие пародонт воспалительно-деструктивные процессы. У пациенток клинической группы в ротовой жидкости по сравнению с контрольной группой наблюдалось увеличение концентрации ИЛ-4 во II и III триместрах в 1,6 раза (p < 0,001 в обоих случаях). ИЛ-4 можно рассматривать как противовоспалительный медиатор, который стимулирует В-лимфоциты и угнетает Т-хелперы 1-го клона [9]. Таким образом, у беременных пациенток с патологией пародонта за счет возросшего уровня ИЛ-4 поддерживается высокая активность местной гуморальной противовоспалительной защиты. Возросшие уровни ИЛ-4 и ИЛ-6 обеспечивают активацию гуморального иммунитета, ограничивая значимость клеточно-обусловленных иммунных реакций [10]. У беременных женщин с ХГП средней степени тяжести по сравнению с пациентками с хроническим пародонтитом легкой степени содержание ИЛ-ф, ИЛ-6 и ФНОа в слюне было достоверно выше, соответственно на 39,2; 27,2 и 55,5% (p < 0,05), а концентрация противовоспалительного медиатора ИЛ-4 снижалась на 34,4% (p < 0,05). Таким образом, у беременных женщин при ХГП повышение степени тяжести заболевания сопряжено с нарастанием уровня провоспалительных цитокинов в ротовой жидкости и снижением противовоспалительной гуморальной защиты. Токсическое действие провоспалительных цитокинов на ткани пародонта связано с их неблагоприятным воздействием на тканевую репарацию, особенно с подавлением нормального процесса ресинтеза соединительной ткани фибробластами, угнетением остеосинтеза, подавлением остеообразующего потенциала. Цитокиновый профиль ротовой жидкости характеризует местный гуморальный статус регуляции состояния тканей пародонта. Развитие ХГП у беременных сопровождалось существенными изменениями иммунных механизмов защиты ротовой полости. В ротовой жидкости накапливаются цито- кины как системного происхождения, так и секретируемые местно клеточными элементами тканей, привлекаемых в область воспаления. Выводы 1. У женщин в течение беременности ХГП к III триместру прогрессирует с повышением степени тяжести заболевания, ухудшением гигиенического состояния полости рта, повышением индексов, отражающих состояние десен и твердых тканей пародонта. 2. Повышенное содержание провоспалительных медиаторов ИЛ-ф, ИЛ-6 и ФНО-а в ротовой жидкости у беременных женщин с ХГП активирует разрушающие пародонт воспалительно-деструктивные процессы и способствует прогрессии стоматологического заболевания. Определение у беременных женщин с ХГП в ротовой жидкости концентрации провоспалительных цитокинов позволяет получить дополнительные оценочные критерии для выделения пациенток с высоким риском прогрессирования заболевания. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки. ЛИТЕРАТУРА

About the authors

Stanislav Yur’evich Maksyukov

Rostov State Medical University, Health Ministry of Russian Federation

Author for correspondence.
Email: kafstom2.rostgmu@yandex.ru
344022, Rostov-on-Don, Russian Federation

V. A Prokhodnaya

Rostov State Medical University, Health Ministry of Russian Federation

Email: info@eco-vector.com
344022, Rostov-on-Don, Russian Federation

E. Kh Chibichyan

Rostov State Medical University, Health Ministry of Russian Federation

Email: info@eco-vector.com
344022, Rostov-on-Don, Russian Federation

V. A Pshenichnyy

Rostov State Medical University, Health Ministry of Russian Federation

Email: info@eco-vector.com
344022, Rostov-on-Don, Russian Federation

References

Supplementary files