Dynamics of indicators of the proteinase-inhibitory system of the body in destructive forms of chronic apical periodontitis during treatment

Svetlana A. Demyanenko; Демьяненко Светлана Александровна; Marina N. Morozova; Морозова Марина Николаевна; Vladimir Z. Kharchenko; Харченко Владимир Захарович; Yulia V. Tofan; Тофан Юлия Владимировна; Leonid L. Aliyev; Алиев Леонид Леонидович; Larisa Kh. Duryagina; Дурягина Лариса Хамидуловна; Lyudmila A. Degtyareva; Дегтярева Людмила Анатольевна; Tamara A. Dubrovina-Parus; Дубровина-Парус Тамара Анатольевна

doi:10.17816/1728-2802-2022-26-4-323-329

Динамика показателей протеиназ-ингибиторной системы организма при деструктивных формах хронического апикального периодонтита на фоне его лечения

Авторы: Демьяненко С.А.¹, Морозова М.Н.¹, Харченко В.З.¹, Тофан Ю.В.¹, Алиев Л.Л.¹, Дурягина Л.Х.¹, Дегтярева Л.А.¹, Дубровина-Парус Т.А.¹
Учреждения:
1. Медицинская академия имени С.И. Георгиевского Крымского федерального университета имени В.И. Вернадского
Выпуск: Том 26, № 4 (2022)
Страницы: 323-329
Раздел: Клинические исследования
Статья получена: 28.07.2022
Статья одобрена: 28.07.2022
Статья опубликована: 29.09.2022
URL: https://rjdentistry.com/1728-2802/article/view/109498
DOI: https://doi.org/10.17816/1728-2802-2022-26-4-323-329
ID: 109498

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ
Доступ закрыт

Доступ предоставлен
Доступ закрыт

Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация
Полный текст
Об авторах
Список литературы
Дополнительные файлы
Статистика

Аннотация

Актуальность. Деструктивные формы хронического апикального периодонтита остаются одной из наиболее сложных проблем не только в стоматологии, эндодонтии, но и в медицине в целом, так как, помимо прогрессирующего местного процесса в альвеолярном отростке челюсти, они являются источником аутоинфекции и аутоинтоксикации, вызывая либо усугубляя патологию различных органов человека.

Цель работы — провести анализ динамики активности неспецифических протеиназ и их ингибиторов у пациентов, страдающих деструктивными формами хронического апикального периодонтита, при выполнении стандартного эндодонтического протокола лечения.

Материал и методы. Были изучены некоторые показатели протеиназ-ингибиторной системы ротовой жидкости и плазмы крови 28 соматически здоровых пациентов в возрасте 25–55 лет с деструктивными формами хронического апикального периодонтита в многокорневых зубах. Каналы были пролечены согласно протоколу Европейского общества эндодонтов: после инструментальной и медикаментозной обработки корневой канал высушивали и временно пломбировали препаратом на основе гидроокиси кальция. Зуб закрывали временной пломбой на 10–14 дней.

Результаты. Сравнительный анализ показателей протеиназ-ингибиторной системы пациентов показал, что наличие деструктивных форм хронического апикального периодонтита и санация патологического очага в большей или меньшей степени отражаются на ее состоянии.

Заключение. Таким образом, изменения показателей протеиназ-ингибиторной системы при развитии хронического апикального периодонтита на фоне проведенного эндодонтического лечения наблюдалось как на местном (в ротовой жидкости), так и на системном уровне (в плазме крови).

Ключевые слова

хронический апикальный периодонтит, ротовая жидкость, плазма крови, протеолиз, протеиназы

Полный текст

АКТУАЛЬНОСТЬ

Деструктивные формы хронического апикального периодонтита (ХАП) остаются одной из наиболее сложных проблем не только в стоматологии, эндодонтии, но и в медицине в целом, так как, помимо прогрессирующего местного процесса в альвеолярном отростке челюсти, они являются источником аутоинфекции и аутоинтоксикации, вызывая либо усугубляя патологию различных органов человека — сердца, почек, легких, суставов и др. [1–3].

Современной научной тенденцией, расширяющей понимание механизмов патогенеза любого хронического заболевания, является изучение изменений различных биохимических систем, регулирующих метаболические процессы в организме. Накоплено много данных о роли системы протеолиза в поддержании гомеостаза и многих патологических реакций. Определено, что источником протеиназ, принимающих участие в развитии хронического деструктивного процесса, служат активированные клетки очага поражения и крови, в частности полиморфноядерные лейкоциты, моноциты и макрофаги [4–7]. При воспалении протеазы нарушают метаболизм основных компонентов соединительнотканного матрикса (коллагена, протеогликанов и гликопротеинов). В случаях неблагоприятного течения деструктивного процесса растет активность ферментов протеолиза на фоне снижения уровня их ингибирующих веществ. В свою очередь, система ингибиторов (антипротеиназы) способствует предохранению тканей и органов от чрезмерного воздействия протеолитических ферментов, ограничивает или вызывает абортивное течение деструктивного процесса. В конечном счете динамический баланс между системами протеиназ и их ингибиторов до включения специфических иммунных факторов обеспечивает первую линию защиты всего организма [8–11].

В настоящее время в клинической практике достаточно широко используются исследования уровня протеиназ и их ингибиторов с широкой и узкой субстратной специфичностью. Однако данных о протеолитической активности при наличии хронических очагов одонтогенной инфекции в литературе немного, и практически не изучен вопрос влияния результатов современного протокола лечения ХАП [5, 12–14] на концентрацию этих веществ в плазме крови (ПК) и ротовой жидкости (РЖ), т.е. на состояние гомеостаза пациента.

Цель работы — проанализировать динамику активности неспецифических протеиназ и их ингибиторов у пациентов, страдающих деструктивными формами ХАП, при выполнении стандартного эндодонтического протокола лечения.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Были изучены некоторые показатели протеиназ-ингибиторной системы РЖ и ПК 28 соматически здоровых пациентов в возрасте 25–55 лет с деструктивными формами ХАП в многокорневых зубах. Каналы были пролечены согласно протоколу Европейского общества эндодонтов: после инструментальной и медикаментозной обработки корневой канал высушивали и временно пломбировали препаратом на основе гидроокиси кальция. Зуб закрывали временной пломбой на 10–14 дней [15, 16]. Для уменьшения проявлений воспаления, связанных с эндодонтическим вмешательством, в первые 3 суток пациентам рекомендовали нестероидные противовоспалительные препараты. Биологический материал собирали до лечения и через сутки после пломбирования корневых каналов постоянным материалом.

В качестве контроля были определены биохимические параметры РЖ и ПК 20 здоровых добровольцев в возрасте 20–45 лет, не страдающих деструктивными формами хронического периодонтита и хроническими соматическими заболеваниями.

Исследование протеолитических ферментов и их ингибиторов проводили с применением спектрофотометрических методов, основанных на определении скорости прироста оптической плотности в ходе ферментативного гидролиза синтетических субстратов. Трипсиноподобную активность (ТПА) ПК и РЖ определяли, измеряя скорость отщепления N-бензоил-L-аргинина от синтетического субстрата этилового эфира N-α-бензоил-L-аргинина. Эластазоподобную активность (ЭПА) определяли по скорости гидролиза синтетического субстрата N-t-вос-аланил-n-нитрофенилового эфира. Антитриптическую активность (АТА) определяли путем регистрации торможения расщепления трипсином субстрата этилового эфира N-α-бензоил-L-аргинина. Для определения активности кислотостабильных ингибиторов (КСИ) проводили предварительную подготовку ПК и РЖ путем их экспозиции в термостате при 60 ℃ на фоне кислых значений рН для полной инактивации лабильных ингибиторов. Полученный экстракт нейтрализовали 0,05 М раствором натрия гидрокарбоната до нейтральных значений, центрифугировали. Дальнейшее определение ингибиторной активности проводили в полученном супернатанте по методике, аналогичной определению АТА [17].

Для статистической обработки данных исследования использовали пакет программ STATISTICA 8.1. Данные считались достоверными при р <0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Проведенный сравнительный анализ показателей протеиназ-ингибиторной системы пациентов показал, что наличие деструктивных форм ХАП и санация патологического очага в большей или меньшей степени отражаются на ее состоянии (данные представлены в табл. 1 и 2).

Таблица 1. Трипсиноподобная и эластазоподобная активность ферментов ротовой жидкости и плазмы крови на фоне лечения хронического апикального периодонтита

Table 1. Trypsin-like and elastase-like activity of OF and BP enzymes during treatment with chronic apical periodontitis

Группа	Трипсиноподобная активность, мкМ/мгмин		Эластазоподобная активность, мкМ/мгмин
Группа	Ротовая жидкость	Плазма крови	Ротовая жидкость	Плазма крови
Контроль	33,91±4,48	0,17±0,01	16,48±1,35	0,21±0,02
До лечения	45,13±3,27	0,28±0,04	26,68±1,37	0,26±0,02
После лечения	59,63±5,00	0,43±0,05	28,61±1,78	0,24±0,03

Таблица 2. Антитриптическая активность и уровень кислотостабильных ингибиторов в ротовой жидкости и плазме крови на фоне лечения хронического апикального периодонтита

Table 2. Antitryptic activity and the level of acid-stable inhibitors in oral fluid and blood plasma against the background of treatment of chronic apical periodontitis

Группа	Антитриптическая активность, мИЕ/мг		Уровень кислотостабильных ингибиторов, мИЕ/мг
Группа	Ротовая жидкость	Плазма	Ротовая жидкость	Плазма
Контроль	25,17±3,88	15,41±1,62	65,51±17,40	3,46±0,36
До лечения	49,00±6,91	22,35±2,35	132,15±8,65	4,51±0,27
После лечения	68,49±22,66	22,07±3,26	127,34±27,14	4,41±0,57

Так, до лечения ТПА РЖ у пациентов (табл. 1) оказалась в среднем на 33,1% (р <0,05) выше контрольных значений. После проведенного эндодонтического лечения наблюдалось дальнейшее достоверное повышение ТПА на 75,9% (р <0,05) по отношению к контролю, что было на 32,1% (р <0,01) выше показателей, зарегистрированных до лечения. Сходная динамика наблюдалась и в отношении изменений активности трипсиноподобных протеиназ в ПК. До лечения изменения ТПА в сравнении с контролем характеризовались тенденцией к повышению, а после лечения ТПА достоверно повысилась на 61,5% (р <0,01). ЭПА РЖ пациентов с деструктивными формами ХАП до лечения была на 41,6% (р <0,01) выше контрольных значений (см. табл. 1). После пломбирования изменений уровня ЭПА РЖ не наблюдалось. Однако при анализе данных каждого пациента следует отметить, что выявлено достоверное снижение до уровня контроля во всех случаях благоприятного течения заболевания, а в случаях обострения процесса наблюдался дальнейший рост ЭПА. В ПК до лечения достоверных изменений уровня ЭПА не наблюдали (р <0,01), по сравнению с контролем.

Развитие деструктивных форм ХАП отразилось на состоянии локального ингибиторного потенциала. АТА РЖ (табл. 2) у пациентов до лечения была в 2 раза (р <0,001) выше контроля, а после лечения наблюдался дальнейший рост (в 3 раза), по сравнению с группой людей, не страдающих заболеваниями периодонта. В ПК до лечения также наблюдалось повышение АТА на 45,2% (p <0,01), по сравнению с контролем, после лечения он достоверно не изменился.

Уровень КСИ в РЖ у пациентов с деструктивными формами ХАП до лечения в 2 раза (р <0,001) превышал уровень контрольных значений. Проведенное лечение достоверно не отразилось на данном параметре (р <0,05). В ПК у пациентов до и после эндодонтического лечения концентрация КСИ достоверно не отличалась от контроля.

ОБСУЖДЕНИЕ

Повышение уровня ТПА при деструктивных формах ХАП отражает степень альтеративного процесса. Известно, что ТПА, помимо прямого деструктивного воздействия на соединительнотканные структуры, способны путем ограниченного протеолиза активировать медиаторные системы (калликреин-кининовую и систему комплемента). Источником ТПА может также служить экзоцитоз привлеченных в очаг воспаления лейкоцитов, а также лизосомы поврежденных клеток. Повышение уровня ТПА на фоне эндодонтического лечения с применением гидроокиси кальция может также объясняться кофакторным действием ионов кальция по отношению к трипсину.

Повышение уровня ЭПА в РЖ при воспалительных заболеваниях является закономерным. Известно, что основным источником эластазы являются активированные нейтрофильные гранулоциты. В такой ситуации повышение их активности способствует усилению неспецифической резистентности, снижающей риск бактериальных осложнений.

Известно, что АТА ПК играет важную ингибиторную роль, предотвращая системную активацию неспецифических протеиназ, способную не только оказывать прямое деструктивное воздействие на белковые компоненты тканей, гистогематических барьеров, но и вызывать активацию компонентов плазменных медиаторов воспаления. Повышение уровня АТА в ПК и РЖ на фоне эндодонтического лечения выступает в роли опосредованного противовоспалительного воздействия на течение заболевания.

Значительный рост уровня АТА можно объяснить не только эффектом эндодонтического лечения, но и поступлением плазменных ингибиторов в очаг воспалительного процесса при экссудации.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, изменения показателей протеиназ-ингибиторной системы при развитии ХАП на фоне проведенного эндодонтического лечения наблюдалось как на местном (в РЖ), так и на системном уровне (в ПК).

До лечения обнаружено умеренное повышение активности неспецифических протеиназ на фоне выраженной активации антипротеиназных механизмов. Умеренное повышение уровня активности как неспецифических протеаз, так и их ингибиторов после эндодонтического лечения может объясняться экзоцитозом лейкоцитов на фоне стимуляции лейкоцитарных реакций продуктами бактериального распада из-за включения в использованном протоколе компонентов с выраженным антибактериальным эффектом, а также эффектом активации клеток околоапикального очага деструкции. После эндодонтического лечения изменения показателей характеризовались признаками активации лейкоцитарных саногенетических механизмов с одновременным повышением локального ингибиторного потенциала, играющего важную роль при воспалительно-деструктивных процессах.

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ / ADDITIONAL INFO

Источник финансирования. Авторы заявляют об отсутствии внешнего финансирования при проведении исследования.

Funding source. This study was not supported by any external sources of funding.

Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.

Competing interests. The authors declare that they have no competing interests.

Вклад авторов. Все авторы внесли существенный вклад в разработку концепции, проведение исследования и подготовку статьи, прочли и одобрили финальную версию перед публикацией.

Author contribution. All authors made a substantial contribution to the conception of the work, acquisition, analysis, interpretation of data for the work, drafting and revising the work, final approval of the version to be published and agree to be accountable for all aspects of the work.